tRNA interpretuje sekwencję nukleotydową mRNA, aby zbudować odpowiadającą mu sekwencję aminokwasów. tRNA odczytuje kodony mRNA do budowy białek. tRNA wykonuje swoją pracę po przygotowaniu mRNA do tłumaczenia.
mRNAskłada się z łańcuchów kodonów, które są zestawami trzech nukleotydów kodujących pojedynczy typ aminokwasu. Celem tRNA jest odczytanie tych zestawów trzech i przetłumaczenie tych informacji w celu uzyskania prawidłowego aminokwasu. tRNA jest połączony z kodonami przez rybosomy, ponieważ każdy kodon aminokwasu ma określone trio nukleotydów. Rybosom znajduje kodon startowy, AUG, a następnie wytwarzany jest prawidłowy tRNA. TRNA produkuje aminokwas, a następnie jest odrzucany, ale aminokwas pozostaje z tyłu. Aminokwasy wiążą się z następnym w łańcuchu, który następnie wiąże się z następnym i tak dalej. Ten ciąg aminokwasów buduje białko.
Proces ten trwa, dopóki rybosom nie znajdzie jednego z kodonów stop, takich jak UGA, a następnie rybosom oderwie się od mRNA i zakończy białko. Zwykle istnieje wiele rybosomów i grup tRNA działających na tej samej nici mRNA w celu wytworzenia białek.