Nietoperze żyją w różnych chłodnych, ciemnych miejscach, w tym w jaskiniach, szczelinach drzew i skał, na strychach i szopach. Nietoperze spędzają cały dzień śpiąc i wyruszają w godzinach nocnych. Zimują one zimą z powodu niedoboru żywności w chłodniejszych miesiącach.
Nietoperze, które przebywają w jaskiniach, zwykle robią to w dużych grupach. W niektórych obszarach często spotyka się grupy nietoperzy z milionami lub więcej. Znajdują się w wysokich punktach jaskiń, więc ważne jest, aby wędrowcy i odkrywcy byli świadomi swojego otoczenia podczas wchodzenia w te ciemne obszary.
Według Centers for Disease Control (CDC) nietoperze są niezwykle pomocne dla ekosystemu, ale znane są również z przenoszenia chorób powodujących choroby i śmierć u ludzi. Wiadomo, że nietoperze przenoszą wściekliznę, chorobę zakaźną występującą również u psów, szopów i skunksów. Nietoperze mogą przenosić wściekliznę na ludzi przez ukąszenia lub jeśli ich ślina wchodzi w kontakt z otwartym kawałkiem lub zarysowaniem.
Nietoperze zwisają do góry nogami podczas snu. Ich mięśnie nie kurczą się podczas wieszania, więc ta pozycja jest całkowicie wygodna. Dodatkowo, pazury nietoperza zawierają specjalny mechanizm blokujący, który pozwala im pozostać mocno uchwyconym podczas wieszania głową do góry nogami, nawet jeśli nietoperz umarł.