DNA rozpakowuje się przed rozmnażaniem komórek i rozpoczyna się, gdy gyraza enzymu umieszcza nicka w jednym końcu nici podwójnej helisy. Inny enzym, helikaza, powoli rozwija pasmo w postaci białek, aby utrzymać boki oddzielone. Więcej enzymów dodaje nukleotydy, sprawdza parowanie i tworzy nowe nici.
DNA nie rozpakowuje się od razu. Gdy gyrase zaczyna rozpakowywać ten jeden koniec, oddziela szczeble na drabinie DNA, po jednej parze bazowej na raz. Gdy podwójna helisa się oddziela, polimeraza DNA zaczyna dodawać prawidłowe nukleotydy na każdej nici, podczas gdy podzbiór tego enzymu zapewnia, że pary są we właściwej kolejności.
Ligaza zaczyna uszczelniać nowo utworzone pary w nową nić DNA. Po całkowitym rozpakowaniu starej nici DNA i utworzeniu dwóch nowych nici, każda nowa nić automatycznie wjeżdża w kształt helisy.
W jednym punkcie procesu replikacji, jeden koniec pierwotnej podwójnej helisy DNA, dwie oddzielone części zawierające tylko połowę nukleotydów i dwie zmontowane nici są nadal połączone. Część, w której dwa nowe pasma są połączone z pasmem macierzystym, nazywana jest widełką replikacji, która porusza się w dół pasma w miarę kontynuowania procesu.