Ciepło jest niezbędne podczas barwienia zarodników, ponieważ zastosowanie ciepła zaburza komórki wegetatywne i powoduje wypłukiwanie zielonego malachitu, co umożliwia następnie wybarwienie w komórkach. Jest to wymagany krok w pewnych zarodniki odporne na tradycyjne metody barwienia przetrwalników.
Według Austin Community College barwienie jest techniką stosowaną przez naukowców do identyfikacji zarodników w próbce bakterii. Jednym z najważniejszych etapów w barwieniu przetrwalników jest przewidywanie właściwości analizowanego zarodnika, ponieważ niektóre z nich są odporne na tradycyjne procesy umierania. Często jest to wynikiem ich twardej zewnętrznej warstwy białka, znanej jako keratyna. W przypadku endospor tego rodzaju konieczne jest zastosowanie techniki barwienia cieplnego, aby zabarwić spory pierwotnym barwnikiem, malachitowym zielonym.
Zastosowanie ciepła osłabia ścianę komórki i pozwala na jej przepłukanie i przeniknięcie barwnikami. Oryginalna komórka tworząca endosporę nazywa się komórką wegetatywną. Komórki te są bardziej wrażliwe na ciepło niż same endospory i mogą być płukane i farbowane na zielono malachitowe. W oparciu o pęcznienie i reakcje endospor, ten proces barwienia można następnie wykorzystać do identyfikacji zarodników, które mają twarde, ochronne warstwy.
