Chociaż żadne żyjące nietoperze nie są całkowicie ślepe, większość nietoperzy polega na dźwiękach, aby znaleźć swoją ofiarę w nocy. Znane jako echolokacje dźwięki ultradźwiękowe są emitowane przez nietoperze odbijające się od innych obiektów. Słuchając echa otaczających obiektów, nietoperze mogą stworzyć wewnętrzną mapę, która pozwoli im nawigować i przechwytywać żywność.
Większość nietoperzy spożywa owady lub małe kręgowce, które dobrze nadają się do znalezienia za pomocą echolokacji. Niektóre nietoperze podczas lotu chwytają liczne małe owady, podczas gdy inne polują na duże owady czające się wśród skał i roślinności. Niektóre nietoperze, pochodzące głównie z Afryki i Azji, zawierają raczej owoce lub pyłki niż owady. Nietoperze, które jedzą owoce i nektar, zwykle używają zmysłów wzroku i węchu, aby znaleźć swoją ofiarę, i mogą być aktywne, zanim zapadnie zmrok.
Nietoperze, które polegają na echolokacji, często mają na swoich twarzach klapki i fałdy skóry. Podczas gdy naukowcy nie rozumieją jeszcze całkowicie swojej funkcji, jest prawdopodobne, że te klapki i fałdy pomagają w wykrywaniu dźwięków zwracanych przez echolokację. Nietoperze wytwarzają echolokację przez nos lub usta. Oprócz dźwięków ultradźwiękowych związanych z echolokacją, nietoperze emitują również różnorodną gamę dźwięków, które są w zasięgu ludzkiego słuchu.
