Mono-hybrydowy krzyż jest rodzajem eksperymentu hodowlanego genetyki między dwoma organizmami macierzystymi, z których każdy ma inną cechę homozygotyczną. Przykładem jest skrzyżowanie rośliny grochu z dominującym zielonym ziarnem i jedno z recesywnym żółtym ziarnem. Potomstwo rodzi się z zielonymi nasionami.
Eksperymenty krzyżowe monohybrydowe zostały spopularyzowane przez austriackiego mnicha Gregora Mendela, który przeprowadził wiele takich eksperymentów z groszkiem ogrodowym. Mendel skrzyżował rośliny grochu, które różniły się jedną cechą, która była łatwa do zaobserwowania, na przykład tekstura nasion, kolor nasion, kolor kwiatów lub nawyk wzrostu. Obserwując potomstwo tych krzyżówek, Mendel był w stanie przewidzieć, które cechy były dominujące i które były recesywne.
