Helicaza DNA enzymu rozpina podwójną helisę DNA, aby umożliwić jej replikację. Helicaza DNA ma prędkość obrotową 10 000 obrotów na minutę i porusza się przed widelcem replikacji. W sposób ciągły rozwija on nici DNA, aby umożliwić polimerazie DNA przyłączenie nowych nici nukleotydowych.
Helicaza DNA jest heksameryczną strukturą pierścieni złożoną z sześciu podjednostek. Rozpina podwójną helisę, rozbijając wiązania wodorowe, łącząc ze sobą nici DNA. Po rozpakowaniu nici z grupą 3 '-OH stają się wiodącą nicią, którą można natychmiast replikować. Nić z grupą 5 '-OH jest nicią opóźniającą i jest replikowana później w procesie zwanym nieciągłą replikacją.