W komórkach eukariotycznych zachodzi glikoliza w cytozolu. Po glikolizie produkty można dalej rozkładać w mitochondriach.
Glikoliza opisuje serię reakcji chemicznych zachodzących w komórce w celu szybkiego wytworzenia energii. Seria reakcji w komórce nazywana jest szlakiem metabolicznym. Glikemia zaczyna się od zmagazynowanych cząsteczek glukozy w postaci uwolnionego glikogenu i przekształca się w związek zwany glukozo-6-fosforanem. Do tego pierwszego etapu potrzebne są dwie cząsteczki trifosforanu adenozyny, które są źródłem energii komórki. Łącznie glikoliza daje w sumie 4 ATP na cząsteczkę glukozy, co oznacza, że na tej drodze występuje zysk netto wynoszący 2 ATP na cząsteczkę glukozy.
