Różnica między bezpośrednim i pośrednim testem ELISA polega na tym, że pośredni test ELISA wymaga dodania drugiego przeciwciała, podczas gdy bezpośredni test ELISA wykorzystuje tylko pierwotne przeciwciało. Pośredni test ELISA jest uważany za bardziej czuły przy wykrywaniu substancji, ale bezpośredni test ELISA to szybszy, tańszy proces, który wymaga mniejszej liczby kroków.
Bezpośredni test ELISA lub test immunoenzymatyczny rozpoczyna się od absorpcji antygenu na płytce. Białko jest następnie dodawane w celu zablokowania wszystkich innych możliwych miejsc wiązania. Pierwsze przeciwciało jest dodawane i wiąże się z dowolnym rozpoznanym epitopem antygenu. Pośredni test ELISA kontynuuje proces przez dodanie drugiego przeciwciała, które wiąże się z pierwszym przeciwciałem. Pierwsze przeciwciało jest dostępne tylko wtedy, gdy jest związane z antygenem.
Oba procesy wymagają licznych płukań laboratoryjnych w celu usunięcia dodatkowych substancji. Proces ELISA jest ważny w laboratorium, ponieważ pozwala naukowcom identyfikować antygeny. Jest to popularny, niezawodny sposób na testowanie chorób i alergenów pokarmowych.
Pośredni test ELISA jest w stanie wykryć mniejsze ilości antygenu i pozwala na użycie jednego wtórnego przeciwciała z mnóstwem różnych pierwszorzędowych przeciwciał. Bezpośredni test ELISA wymaga większych ilości antygenu w celu wykrycia i nie jest tak elastyczny, ponieważ używane jest tylko jedno przeciwciało.
