Pierwotne zabarwienie stosuje się do barwienia metodą Grama w celu wykrycia bakterii Gram-dodatnich. Pierwotne zabarwienie ma kolor fioletu krystalicznego. Gdy bakteria jest Gram-ujemna, traci pierwotne zabarwienie i przyjmuje wtórne zabarwienie safraniny.
Różnice w grubości warstwy peptydoglikanu w błonie komórkowej bakterii umożliwiają odróżnienie bakterii Gram-dodatnich od bakterii Gram-ujemnych. Bakterie Gram-dodatnie mają grubszą warstwę peptydoglikanu i są w stanie zachować pierwotny kolor fioletu krystalicznego.
Barwienie metodą Grama jest procesem składającym się z trzech etapów, który obejmuje wstępne barwienie, odbarwianie w celu odwodnienia warstwy peptydoglikanu i wtórne barwienie w celu określenia rodzaju bakterii.
