Przedmioty objęte kluczem dychotomicznym to: bakterie Gram dodatnie lub ujemne, katalaza dodatnia lub ujemna, enzymy azotanowe i enzym koagulazy. Kluczem jest zestaw pytań, które po zakończeniu pomogą zidentyfikować bakterie. Każde pytanie wymaga ukończenia określonego testu.
Test Gram-dodatni lub Gram-ujemny określa, czy bakterie są obecne w próbce. Materiał jest barwiony i umieszczany pod mikroskopem w celu badania. Negatywna plama Gram zwykle pojawia się jako różowy i wskazuje, że nie znaleziono żadnego organizmu. Dodatnie plamy Gram są zazwyczaj fioletowe i zazwyczaj mają więcej struktur na slajdzie.
Test katalazy służy do identyfikacji gronkowców, odczytów pozytywnych lub paciorkowców, odczyt negatywny. Bakterie z dodatnią zawartością katalizatora pobierają tlen, podczas gdy bakterie z ekspresją katalazy są zwykle beztlenowe.
Test na redukcję azotanów określa, czy bakteria produkuje jeden z dwóch enzymów, reduktazę azotową lub reduktazę azotynową. Materiał hoduje się w pożywce zawierającej azotan potasu. Jeśli podłoże wzrasta na czerwono, a bąbelki pojawiają się w dołączonej rurce Durhama, obecny jest azot.
Test koagulazy określa, czy bakterie zawierają koagulazy, enzym krzepnięcia krwi. Test przeprowadza się przy użyciu czystej surowicy krwi. Jeśli enzym jest obecny, surowica chmurnieje i gęstnieje.